فهرست مطالب
عنوان صفحه
چکیده————————————————————-2-1
مقدمه—————————————————————3
فصل اول : مروری بر تحقیقات گذشته
1-1 پیشینه تحقیق—————————————————- 8-5
1-2 تاکسونومی—————————————————– 9-8
1-3 مشخصات کلی راسته کفال ماهی شکلان ———————————–9
1-4 مشخصات خانواده کفال ماهیان —————————————-10
1-5 مشخصات کفال طلایی ——————————————-12-10
1-6 زیست شناسی کفال طلایی —————————————–13-12
1-6-1 مشخصات زیستی کفال طلایی —————————————13
1-6-1-1 تحمل درجه حرارت ——————————————–13
1-6-1-2 تحمل شوری ————————————————-13
1-6-1-3 تحمل مقادیر اکسیژن ——————————————–13
1-6-1-4 تغذیه کفال طلایی ——————————————-14-13
1-7 ارزش اقتصادی کفال ماهیان —————————————-15-14
1-8 ارزش غذایی ماهی کفال ——————————————— 16
1-9 پراکنش کفال ماهیان ———————————————18-16
1-10 دریای خزر————————————————– 22-18
1-11 تولید مثل کفال طلایی ——————————————-23-22
1-11-1 دستگاه تولید مثل کفال طلایی ————————————25-23
1-11-2 اسپرماتوژنز —————————————————25
1-11-3 ساختمان اسپرماتوزوئید ——————————————- 26
1-11-4 فعالیت اسپرماتوزوئید ——————————————– 27
1-11-5 رابطه بین میزان ATP و تحرک اسپرم ——————————— 28
1-11-6 مکانیزم چرخشی انتقال انرژی در ATP سنتاز ————————- 31-28
1-11-7 AMP حلقوی بعنوان یک پیامبر ثانویه —————————— 37-32
1-11-8 extenders ———————————————– 40-37
فصل دوم: روش تحقیق و مواد
2-1 مواد و وسایل مورد نیاز ——————————————- 43-42
2-1-1 خصوصیات کیت تعیین ATP ————————————— 43
2-1-2 اجزای کیت تعیین ATP —————————————— 43
2-1-3 روش آماده سازی محلولها ——————————————44
2-1-4 خصوصیات و کاربردهای بافر HEPES —————————– 45-44
2-1-5 روش آماده سازی محلول بافر HEPES——————————— 45
2-1-6 روش آماده سازی محلول بی کربنات سدیم——————————- 46
2-1-7 روش آماده سازی محلول گلیسرول 10% و گلوکزM 3/0 ——————— 46
2-2 روش کار —————————————————- 50-46
فصل سوم : نتایج تحقیق
نتایج ———————————————————- 62-52
فصل چهارم: بحث و نتیجه گیری و پیشنهادات
بحث و نتیجه گیری ————————————————- 69-64
پیشنهادات ———————————————————- 70
منابع فارسی ———————————————————71
منابع لاتین——————————————————- 76-72
فهرست جداول
عنوان صفحه
جدول 1-1 ——————————————————– 33
جدول 3-1——————————————————— 53
جدول 3-2——————————————————— 53
جدول 3-3——————————————————— 53
جدول 3-4——————————————————— 53
جدول 3-5——————————————————— 54
جدول 3-6——————————————————— 54
جدول 3-7——————————————————— 54
جدول 3-8——————————————————— 55
جدول 3-9——————————————————— 55
جدول 3-10——————————————————- 55
جدول 3-11——————————————————- 55
فهرست نمودارها
عنوان صفحه
نمودار1———————————————————— 56
نمودار 2———————————————————– 57
نمودار 3———————————————————– 58
نمودار 4———————————————————– 59
نمودار 5———————————————————– 60
نمودار 6 ———————————————————- 61
نمودار 7———————————————————– 62
فهرست اشکال
عنوان صفحه
شکل 1-1 ——————————————————— 10
شکل 1-2———————————————————- 11
شکل 1-3———————————————————- 17
شکل 1-4———————————————————- 26
شکل 1-5———————————————————- 29
شکل 1-6———————————————————- 35
شکل 1-7———————————————————- 36
شکل 2-1———————————————————- 45
چکیده
کفال ماهیان دریای خزر یکی از مهمترین ماهیان شیلاتی این دریا می باشند.که پس از انتقال از دریای سیاه به دریای خزر، توانستند خود را بااکوسیستم این دریا مطاقبت دهند.
هدف از این تحقیق بررسی میزان ATP اسپرم ماهی کفال طلایی در شرایط زمانی،دمایی و محلولهای تداوم بخش (Extender) مختلف بوده است. بدین منظور میزان ATP اسپرمهای تازه نمونه گیری شده در دماهای مختلف (°C12- 10،20 -18)، میزان ATPاسپرمهای نگهداری شده دردماهای مختلف (°C 4،Room temperature ) به مدت 6 ساعت، میزان ATP اسپرمهای نگهداری شده در محلولهای تداوم بخش (extender)مختلف (گلیسرول، محلول نمک 7/0% ، محلول نمک 65/0%) به مدت 5 روز، میزان ATP اسپرمهای نگهداری شده در همان شرایط به مدت 10 روز، به روش فوق حساس بیولومینوسانس اندازه گیری گردید.
براساس آزمایشات انجام شده در این تحقیق، غلظت ATP اسپرمهای تازه نمونه گیری شده در دمای °C 12- 10، 22/7 ± 04/74درصد غلظت ATP اسپرمهای تازه نمونه گیری شده در دمای °C20- 18 بود.اسپرمهای نگهداری شده در دمای °C 4 یخچال به مدت 6 ساعت و اسپرمهای نگهداری شده در دمای آزمایشگاه به مدت 6 ساعت به ترتیب 91/0 ± 26/90 درصد و 49/1 ± 17/17 درصد ATP خود را حفظ کردند. نگهداری اسپرم درextender های مختلف (گلیسرول، محلول نمک 7/0% ، محلول نمک 65/0%) به مدت 5 روز نشان داد که گلیسرول و محلول نمک 65/0%، درصد بالاتری از ATP را نسبت به محلول نمک 7/0% حفظ کردند. نگهداری اسپرم درهمان extenderها به مدت 10 روز نشان داد که گلیسرول درصد بالاتری از ATP را نسبت به محلول نمک 7/0% و 65/0% حفظ کرد. اسپرمهای نگهداری شده در گلیسرول در دمای °C 15- بعد از 5 روز و اسپرمهای نگهداری شده در گلیسرول در دمای °C 15- بعد از 10 روز به ترتیب 5/4 ± 19/74 و 2/6 ± 67/47 درصد ATP خود را حفظ کردند. اسپرمهای نگهداری شده در محلول نمک 7/0% در دمای °C 1 بعد از 5 روز و اسپرمهای نگهداری شده در محلول نمک 7/0% در دمای °C 1 بعد از 10 روز به ترتیب 81/2 ± 65/13 و 06/0 ± 69/0 درصد ATP خود را حفظ کردند. اسپرمهای نگهداری شده در محلول نمک 65/0% در دمای °C15- بعد از 5 روز و اسپرمهای نگهداری شده درمحلول نمک 65/0% در دمای °C 15 – بعد از 10 روز به ترتیب 68/6 ± 58/73 و 12/0 ±05/1 درصد ATP خود را حفظ کردند.
براساس نتایج به دست آمده برای حفظ میزان ATP اسپرم ماهی کفال طلایی، نمونه گیری در دمای °C20- 18 و نگهداری در گلیسرول توصیه می شود.
مقدمه
اسپرم عامل مهم تولیدمثل، بقاء و تداوم نسل است. بررسی اسپرم از نظر پارامترهایی مانند توانایی تلقیح، تحرک، درصد اسپرمهای متحرک، سرعت حرکت، فرکانس ضربه تاژکی، میزانATP و فاکتورهای شیمیایی و بیوشیمیایی، در تشخیص کیفیت اسپرم و کنترل روند تولیدمثلی برخی جانداران از جمله آبزیان کمک می کند. هدف از این تحقیق بررسی میزان ATP اسپرم ماهی کفال طلایی در شرایط دمایی ، زمانی و محلولهای تداوم بخش مختلف می باشد. تاکنون تحقیقات گسترده ای توسط پژوهشگران مختلف روی این سلول صورت گرفته است. با این حال مطالعات انجام شده در ارتباط با میزان ATP اسپرم ماهیان نسبتأ محدود است. این امر تفسیر علت ناموفق بودن پروژه پرورشی کردن برخی ماهیان را دشوار می کند. در این رابطه باید مطالعات بیشتری در زمینه بررسی میزان ATP اسپرم ماهیان صورت پذیرد.
اسپرم به کمک حرکت ضربه ای تاژک خود شنا می کند. انرژی مورد نیاز برای این حرکت ازطریق هیدرولیز ATP فراهم می شود(Billard et al, 1999 ).تحرک اسپرم به میزان ATPذخیره ای اولیه (Christen et al, 1987) و میزان ATP سنتز شده در طول فاز تحرک (Lahnsteiner et al, 1999 ) وابسته است. در اکثر ماهیانی که دارای لقاح خارجی هستند، ATP سنتتاز قادر به نگهداری نسبتهای بالای ATP هیدرولیز شده مورد نیاز در طول حرکت نیست، لذا میزان ATPبه سرعت کاهش می‌یابد. این کاهش ATP به موازات کاهش تعداد ضربات تاژکی و سرعت حرکت اسپرم است (Christen et al, 1987 و Perchec et al, 1995). تفاوت قابل توجهی بین گونه‌ها در مقدارATP مورد نیاز برای تامین حرکت اسپرم وجود دارد(Mansour et al, 2003 ).
در این مطالعه میزان ATP اسپرم ماهی کفال طلایی در شرایط مختلف دمایی نمونه گیری (10-12و 18-20 درجه سانتیگراد) و نگهداری 6 ساعته در دماهای مختلف ( دمای اتاق و 4 درجه سانتی گراد) در محلولهای تداوم بخش مختلف( گلیسرول، محلولهای نمکی 65/0 و 7/0 درصد) در زمانهای متفاوت ( 5 روز و 10 روز) به کمک روش فوق حساس بیولومینوسانس مورد اندازه گیری قرار خواهد گرفت.
متن کامل را می توانید دانلود نمائید چون فقط تکه هایی از متن پایان نامه در این صفحه درج شده (به طور نمونه)
ولی در فایل دانلودی متن کامل پایان نامه
همراه با تمام ضمائم (پیوست ها) با فرمت ورد word که قابل ویرایش و کپی کردن می باشند
موجود است
پایان نامه کارشناسی ارشد رشته بیولوژی ماهیان دریا – اسپرم مولدین نر ماهی کفال طلایی-- 90 ص