پایان نامه کارشناسی ارشد بررسی قابلیت ترکیب‌پذیری عمومی و خصوصی برای صفت عملکرد در ده ایزوله خالص هموکاریون قارچ خوراکی

اختصاصی از اس فایل پایان نامه کارشناسی ارشد بررسی قابلیت ترکیب‌پذیری عمومی و خصوصی برای صفت عملکرد در ده ایزوله خالص هموکاریون قارچ خوراکی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

فرمت فایل: word

تعداد صفحه:70

دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج

 پایان نامه جهت اخذ درجه کارشناسی ارشد در رشته اصلاح نباتات

عنوان:

بررسی قابلیت ترکیب‌پذیری عمومی و خصوصی برای صفت عملکرد

در ده ایزوله خالص هموکاریون قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید (Agaricus bisporus)

کیده

در بین قارچهای خوراکی، قارچ خوراکی تکمه&zwnj ای سفید رایج&zwnj ترین قارچی است که در سراسر جهان کشت می&zwnj شود. کشت این قارچ نخستین بار در قرن هفدهم میلادی در فرانسه شروع شد ولی تاکنون نسبت به گیاهان زراعی تلاشهای کمتری در مورد اصلاح آن صورت گرفته است. در حال حاضر حدود 38% کل تولید قارچهای خوراکی دنیا، به قارچ خوراکی تکمه&zwnj ای سفید اختصاص داده شده است. علیرغم اهمیت اقتصادی زیاد و تولید وسیع جهانی قارچ خوراکی تکمه&zwnj ای سفید، برنامه&zwnj های اصلاحی این قارچ به علل زیر با مشکلات زیادی روبرو بوده است. نخست این که بیشتر بازیدیوسپورهای این قارچ حاوی دو هستة هاپلوئید متفاوت و سازگار از نظر جنسی می&zwnj باشد که پس از تندش تشکیل یک میسلیوم هتروکاریوتیکی بارور می&zwnj دهد و تنها درصد اندکی از بازیدیوسپورها تک هسته&zwnj ای (یا با دو هسته مشابه) بوده و قابلیت انجام دو رگ&zwnj گیری را دارند. دوم این که اختلاف فنوتیپی قابل مشاهده&zwnj ای بین میسلیوم&zwnj های هموکاریون و هتروکاریون وجود ندارد و در نهایت آن که تندش اسپور به عنوان اولین گام در یک برنامة اصلاحی بسیار ضعیف و ناهماهنگ است و غالباً با آلودگی&zwnj های باکتریایی همراه می&zwnj باشد. با وجود مشکلات فوق و پیشرفت&zwnj هایی که در اصلاح این قارچ صورت گرفته است. روشهای بهبود نژادی در این قارچ عبارتند از: وارد کردن نژادهای مرغوب، جمع&zwnj آوری ژرم پلاسمهای وحشی، گزینش درون نژادی، دورگ&zwnj گیری و مهندسی ژنتیک. در حال حاضر مهم&zwnj ترین برنامه اصلاحی این قارچ براساس دو رگ&zwnj گیری هدفمند در بین هموکاریون&zwnj ها می&zwnj باشد. در روش دو رگ&zwnj گیری، هدف آن است که به یک نژاد با شاخص&zwnj های ژنتیکی مطلوب والدین و در نهایت بهبود صفات کمی و کیفی دست یافت. در این تحقیق ده جدایه هموکاریون مختلف که مورد تأیید قرار گرفته است، با انجام تلاقی دای&zwnj آلل در بین آنها، سعی در گرد&zwnj آوری ژن&zwnj های مطلوب نژادهای مزبور در یک نژاد جدید دو رگ و بهبود ژنتیکی برای صفت عملکرد نموده&zwnj ایم. نتایج مربوط به دورگ&zwnj گیری نشان می&zwnj دهد، وقوع پدیده&zwnj هایی همچون اثر متقابل میسلیومی در محل انجام تلاقی، تغییر سرعت رشد و ریخت&zwnj پرگنه دو رگ نسبت به جفت هموکاریون&zwnj ها، می&zwnj تواند به عنوان معیارهایی جهت انتخاب هیف از محل تلاقی در نظر گرفته شود. در زمان رشد دو رگ&zwnj ها در محیط کشت PDA، قطر پرگنه، تیپ رشدی پرگنه یادداشت برداری شد. دو&zwnj رگ&zwnj های حاصله جهت تأیید، به آزمون میوه&zwnj دهی برده شد که با استفاده از طرح بلوک کامل تصادفی با دو تکرار مورد آزمون عملکرد قرار گرفتند. در طی این مرحله خصوصیاتی نظیر زمان پر کردن اسپاون، میزان عملکرد، وزن تک میوه اندازه&zwnj گیری شد. سپس با انجام تجزیه دای&zwnj آلل، قابلیت ترکیب&zwnj پذیری عمومی و خصوصی اندازه&zwnj &zwnj گیری گردید و بهترین جدایه هموکاریون (A15-8) و بهترین دو رگ (130-7 A 15-6 ) مشخص شد. همچنین با بدست آوردن نسبت واریانس ترکیب&zwnj پذیری عمومی به خصوصی، اهمیت هر یک از اثرات افزایشی و غالبیت در کنترل صفت عملکرد تعیین شد. بطوریکه این نسبت، معنی&zwnj دار نبود که دلالت بر عمل غالبیت ژنها دارد یعنی صفت عملکرد توسط عمل غالبیت ژنها کنترل شده است. جدول تجزیه واریانس نشان داد که اثر بلوک بی&zwnj معنی است. همچنین ضریب تغییرات آزمایش حدود 5/12% بود و نشان می&zwnj داد که آزمایش دارای دقت بالایی است. نتایج سرعت رشد پرگنه نشان داد که سرعت رشد میسلیوم هموکاریون بسیار کمتر از میسلیوم دو رگ است. همچنین بین قطر پرگنه و عملکرد همبستگی مثبت وجود دارد. نتایج حاصل از تجزیه دای&zwnj الل نشان می&zwnj دهد که می&zwnj توان بهترین دو رگ&zwnj ها و برترین جدایه&zwnj های آمیزشی را جهت تسریع برنامه&zwnj های اصلاحی بعدی معرفی نمود.

فصل اول: مقدمه

دلایل عمده عملکرد پایین قارچ خوراکی تکمه&zwnj ای سفید در ایران

فصل دوم: بررسی منابع

تاریخچه پرورش قارچ خوراکی تکمه&zwnj ای سفید

آشنایی اجمالی با قارچ خوراکی تکمه&zwnj ای سفید

طبقه&zwnj بندی

رده بندی

اندام شناسی قارچ خوراکی تکمه&zwnj ای سفید

مشخصات پرگنه در کشت خالص

نامگذاری علمی قارچ خوراکی تکمه&zwnj ای سفید:

تقسیم بندی واحدهای سلولی میسلیوم از لحاظ تعداد و ترکیب&zwnj بندی هسته&zwnj ای

&zwnj چرخ زندگی قارچ خوراکی تکمه&zwnj ای سفید

بررسی الگوهای چرخه زندگی در قارچ خوراکی تکمه&zwnj ای سفید

الف ـ هموتالیسم

ب ـ هتروتالیسم

ژنتیک قارچ خوراکی تکمه&zwnj ای سفید

روشهای بهبود نژادی در قارچ خوراکی تکمه&zwnj ای سفید:

کشت بافت

گزینش از طریق کشت تک اسپوری

تهیه نقش اسپور

الف ـ کشت و گزینش تک اسپوری

ب ـ کشت و گزینش چند اسپوری

اختلاط ساده

تلاقی هدفمند هموکاریون&zwnj ها

بدست آوردن هموکاریون و تایید آنها

1ـ روش سنتی تأیید هموکاریون&zwnj ها

2ـ تهیه و تایید هموکاریونهای والدی به روش تهیه پروتوپلاست

3ـ تایید هموکاریونها با استفاده از نشانگر RFLP

4ـ تایید هموکاریون&zwnj ها با استفاده از نشانگر RAPD

انجام تلاقی بین هموکاریونها و تایید هیبریدها:

الف ـ استفاده از نشانگرهای غذایی برای تایید هیبریدها:

ب ـ استفاده از آیزوزایم&zwnj ها برای تایید هیبریدها:

ج ـ استفاده از نشانگرهای مقاومت برای تأیید هیبرید&zwnj ها

اصلاح برخی صفات با استفاده از روش تلاقی هیبریدها:

د ـ استفاده از نشانگرهای مورفولوژیکی برای تایید هیبریدها:

مراحل انجام آزمون اصلاحی از طریق دورگ&zwnj گیری هدفمند:

1ـ کشت اسپور

2ـ جداسازی تک اسپورها

3ـ تهیه اسپاون

آزمون میوه&zwnj دهی

الف ـ تهیه بستر کشت:

ب ـ مراحل پرورش و میوه&zwnj دهی:

تولید پریموردیا در سطح محیط کشت:

تولید اجسام میوه دهی در اسپاون

&zwnj ج ـ تولید اندام باردهی در کمپوست

مهندسی ژنتیک

1ـ انتقال ژن

2ـ اختلاط پروتوپلاستها

فصل سوم: مواد و روشها

تهیه نژادها

روش تهیه محیط کشت غذایی PDA

روش کشت هموکاریون&zwnj ها

روش تلاقی هموکاریون&zwnj ها

نمونه&zwnj گیری از منطقه تلاقی

تهیه اسپاون مادری از هیبریدها

تلقیح دانه&zwnj های گندم با کشت هیبرید

تهیه بستر کشت (کمپوست)

الف ـ پاستوریزاسیون و آمونیاک&zwnj زدایی

ب ـ مایه&zwnj زنی کمپوست

ج ـ خاک&zwnj دهی بستر کشت

هوادهی و افت سریع دما

محاسبه قابلیت ترکیب&zwnj پذیری عمومی و خصوصی

محاسبه واریانس ترکیب&zwnj پذیریی عمومی و خصوصی

محاسبه واریانس افزایشی و غالبیت

فصل چهارم نتایج و بحث

نتایج بررسی سرعت رشد (قطر پرگنه هموکاریون&zwnj ها)

تیپ رشدی پرگنه هموکاریون

نتایج سرعت رشد در هتروکاریو&zwnj ن&zwnj ها

نتایج مشاهده&zwnj ای تهیه اسپاون

نتایج مشاهدای آزمون میوه&zwnj دهی

جدول تجزیه واریانس برای صفت عملکرد در دورگ&zwnj ها

جدول قابلیت ترکیب&zwnj پذیری عمومی در هموکاریون&zwnj ها

جدول قابلیت ترکیب&zwnj پذیری خصوصی دورگ&zwnj ها

جدول مقادیر اجزاء ژنتیکی

ضریب همبستگی

پیشنهادات

منابع

پیوست

چکیده انگلیسی

پایان نامه بررسی قابلیت ترکیب‌پذیری عمومی و خصوصی برای صفت عملکرد در ده ایزوله خالص هموکاریون قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید

اختصاصی از اس فایل پایان نامه بررسی قابلیت ترکیب‌پذیری عمومی و خصوصی برای صفت عملکرد در ده ایزوله خالص هموکاریون قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

تعداد  صفحات : 68   
فرمت فایل: word(قابل ویرایش)  
 فهرست مطالب:
عنوان                                             صفحه
چکیده    1
فصل اول: مقدمه
دلایل عمده عملکرد پایین قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید در ایران     8
فصل دوم: بررسی منابع
تاریخچه پرورش قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید     10
آشنایی اجمالی با قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید     12
طبقه‌بندی     12
رده بندی     12
اندام شناسی قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید     13
مشخصات پرگنه در کشت خالص     15
نامگذاری علمی قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید:    15
تقسیم بندی واحدهای سلولی میسلیوم از لحاظ تعداد و ترکیب‌بندی هسته‌ای     16
‌چرخ زندگی قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید     16
بررسی الگوهای چرخه زندگی در قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید     19
الف ـ هموتالیسم     19
ب ـ هتروتالیسم     20
ژنتیک قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید     22
روشهای بهبود نژادی در قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید:    24
کشت بافت     25
گزینش از طریق کشت تک اسپوری    26
تهیه نقش اسپور     26
الف ـ کشت و گزینش تک اسپوری     26
ب ـ کشت و گزینش چند اسپوری     27
اختلاط ساده    28
تلاقی هدفمند هموکاریون‌ها    28
بدست آوردن هموکاریون و تایید آنها    29
1ـ روش سنتی تأیید هموکاریون‌ها    29
2ـ تهیه و تایید هموکاریونهای والدی به روش تهیه پروتوپلاست     30
3ـ تایید هموکاریونها با استفاده از نشانگر RFLP    30
4ـ تایید هموکاریون‌ها با استفاده از نشانگر RAPD     31
انجام تلاقی بین هموکاریونها و تایید هیبریدها:     32
الف ـ استفاده از نشانگرهای غذایی برای تایید هیبریدها:    33
ب ـ استفاده از آیزوزایم‌ها برای تایید هیبریدها:     34
ج ـ استفاده از نشانگرهای مقاومت برای تأیید هیبرید‌ها    34
اصلاح برخی صفات با استفاده از روش تلاقی هیبریدها:     34
د ـ استفاده از نشانگرهای مورفولوژیکی برای تایید هیبریدها:     35
مراحل انجام آزمون اصلاحی از طریق دورگ‌گیری هدفمند:     35
1ـ کشت اسپور    35
2ـ جداسازی تک اسپورها     36
3ـ تهیه اسپاون     36
آزمون میوه‌دهی     36
الف ـ تهیه بستر کشت:     36
ب ـ مراحل پرورش و میوه‌دهی:     37
تولید پریموردیا در سطح محیط کشت:     38
تولید اجسام میوه دهی در اسپاون    38
‌ج ـ تولید اندام باردهی در کمپوست    39
مهندسی ژنتیک    39
1ـ انتقال ژن     39
2ـ اختلاط پروتوپلاستها    40
فصل سوم: مواد و روشها
تهیه نژادها     42
روش تهیه محیط کشت غذایی PDA    42
روش کشت هموکاریون‌ها     43
روش تلاقی هموکاریون‌ها    44
نمونه‌گیری از منطقه تلاقی     45
تهیه اسپاون مادری از هیبریدها    45
تلقیح دانه‌های گندم با کشت هیبرید    46
تهیه بستر کشت (کمپوست)    47
الف ـ پاستوریزاسیون و آمونیاک‌زدایی     49
ب ـ مایه‌زنی کمپوست     49
ج ـ خاک‌دهی بستر کشت    49
هوادهی و افت سریع دما    50
محاسبه قابلیت ترکیب‌پذیری عمومی و خصوصی     53
محاسبه واریانس ترکیب‌ پذیریی عمومی و خصوصی    53
محاسبه واریانس  افزایشی و غالبیت    53
فصل چهارم نتایج و بحث
نتایج بررسی سرعت رشد (قطر پرگنه هموکاریون‌ها)    55
تیپ رشدی پرگنه هموکاریون     55
نتایج سرعت رشد در هتروکاریو‌ن‌ها     59
نتایج مشاهده‌ای تهیه اسپاون     60
نتایج مشاهدای آزمون میوه‌دهی     60
جدول تجزیه واریانس برای صفت عملکرد در دورگ‌ها     61
جدول قابلیت ترکیب‌پذیری عمومی در هموکاریون‌ها     64
جدول قابلیت ترکیب‌پذیری خصوصی دورگ‌ها     64
جدول مقادیر اجزاء ژنتیکی     66
ضریب همبستگی     66
پیشنهادات     67
منابع     69
پیوست    75
چکیده انگلیسی     78

چکیــده
در بین قارچهای خوراکی، قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید رایج‌ترین قارچی است که در سراسر جهان کشت می‌شود. کشت این قارچ نخستین بار در قرن هفدهم میلادی در فرانسه شروع شد ولی تاکنون نسبت به گیاهان زراعی تلاشهای کمتری در مورد اصلاح آن صورت گرفته است. در حال حاضر حدود 38% کل تولید قارچهای خوراکی دنیا، به قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید اختصاص داده شده است.
علیرغم اهمیت اقتصادی زیاد و تولید وسیع جهانی قارچ خوراکی تکمه‌ای سفید، برنامه‌های اصلاحی این قارچ به علل زیر با مشکلات زیادی روبرو بوده است. نخست این که بیشتر بازیدیوسپورهای این قارچ حاوی دو هستة هاپلوئید متفاوت و سازگار از نظر جنسی می‌باشد که پس از تندش تشکیل یک میسلیوم هتروکاریوتیکی بارور می‌دهد و تنها  درصد اندکی از بازیدیوسپورها تک هسته‌ای (یا با دو هسته مشابه) بوده و قابلیت انجام دو رگ‌گیری را دارند. دوم این که اختلاف فنوتیپی قابل مشاهده‌ای بین میسلیوم‌های هموکاریون و هتروکاریون وجود ندارد و در نهایت آن که تندش اسپور به عنوان اولین گام در یک برنامة اصلاحی بسیار ضعیف و ناهماهنگ است و غالباً با آلودگی‌های باکتریایی همراه می‌باشد. با وجود مشکلات فوق و پیشرفت‌هایی که در اصلاح این قارچ صورت گرفته است. روشهای بهبود نژادی در این قارچ عبارتند از: وارد کردن نژادهای مرغوب، جمع‌آوری ژرم پلاسمهای وحشی، گزینش درون نژادی، دورگ‌گیری و مهندسی ژنتیک. در حال حاضر مهم‌ترین برنامه اصلاحی این قارچ براساس دو رگ‌گیری  هدفمند در بین هموکاریون‌ها می‌باشد. در روش دو رگ‌گیری، هدف آن است که به یک نژاد با شاخص‌های ژنتیکی مطلوب والدین و در نهایت بهبود صفات کمی و کیفی دست یافت. در این تحقیق ده جدایه هموکاریون مختلف که مورد تأیید قرار گرفته است، با انجام تلاقی دای‌آلل در بین آنها، سعی در گرد‌آوری ژن‌های مطلوب نژادهای مزبور در یک نژاد جدید دو رگ و بهبود ژنتیکی برای صفت عملکرد نموده‌ایم. نتایج مربوط به دورگ‌گیری نشان می‌دهد، وقوع پدیده‌هایی همچون اثر متقابل میسلیومی در محل انجام تلاقی، تغییر سرعت رشد و ریخت‌ پرگنه دو رگ نسبت به جفت هموکاریون‌ها، می‌تواند به عنوان معیارهایی جهت انتخاب هیف از محل تلاقی در نظر گرفته شود. در زمان رشد دو رگ‌ها در محیط کشت PDA، قطر پرگنه، تیپ رشدی پرگنه یادداشت برداری شد. دو‌رگ‌های حاصله جهت تأیید، به آزمون میوه‌دهی برده شد که با استفاده از طرح بلوک کامل تصادفی با دو تکرار مورد آزمون عملکرد قرار گرفتند. در طی این مرحله خصوصیاتی نظیر زمان پر کردن اسپاون، میزان عملکرد، وزن تک میوه اندازه‌گیری شد. سپس با انجام تجزیه دای‌آلل، قابلیت ترکیب‌پذیری عمومی و خصوصی اندازه‌‌گیری گردید و بهترین جدایه هموکاریون (A15-8) و بهترین دو رگ  (130-7  A 15-6  ) مشخص شد. همچنین با بدست آوردن نسبت واریانس ترکیب‌پذیری عمومی به خصوصی، اهمیت هر یک از اثرات افزایشی و غالبیت در کنترل صفت عملکرد تعیین شد. بطوریکه این نسبت، معنی‌دار نبود که دلالت بر عمل غالبیت ژنها دارد یعنی صفت عملکرد توسط عمل غالبیت ژنها کنترل شده است. جدول تجزیه واریانس نشان داد که اثر بلوک بی‌معنی است. همچنین ضریب تغییرات آزمایش حدود 5/12% بود و نشان می‌داد که آزمایش دارای دقت بالایی است. نتایج سرعت رشد پرگنه نشان داد که سرعت رشد میسلیوم هموکاریون بسیار کمتر از میسلیوم دو رگ است. همچنین بین قطر پرگنه و عملکرد همبستگی مثبت وجود دارد. نتایج حاصل از تجزیه دای‌الل نشان می‌دهد که می‌توان بهترین دو رگ‌ها و برترین جدایه‌های آمیزشی را جهت تسریع برنامه‌های اصلاحی بعدی معرفی نمود.